Zellfraktionierung
Um die einzelnen Organellen einer Zelle zu trennen muss man die Zelle
aufschliessen (durch Ultraschall, einen osmotischen Schock oder
ähnliches). So erhält man einen zellfreien Extrakt oder Homogenat.
Das Homogenat wird dann mit einer Ultrazentrifuge aufgetrennt. Dazu
bringt man in einem Reagenzglas einen Dichtegradienten an, in dem man
das Homogenat zentrifugiert. Die einzelnen Organellen sedimentieren
entsprechend ihrem Sedmentationskoeffizienten und können so
aufgetrennt werden.
Bei einem anderen Verfahren werden die Komponenten gemäss ihrer
Schwebedichte getrennt. Die zentrifugation benutzt einen
Dichtegradienten von einer sehr hohen Saccharosekonzentration und
produziert eine Reihe individueller Banden, die mit hoher Genauigkeit
der spezifischen Dicht der Organellen ensprechen. Man kann mit dieser
Methode sogar Molküle mit unterschiedlichen Isotopen eines Atoms
voneinandern trennnen.
Auf diese Art und Weise erhält man zellfreie Systeme, die zwar noch
eine biologische Funktion besitzen, allerdings auf eines oder wenige
Organellen beschränkt sind. Auf diese weise konnt beispielsweise die
Proteinsynthese aufgeklärt werden.
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